Tạp chí

Phân lập và xác định cấu trúc hợp chất alcaloid ức chế acetyl cholinesterase của loài Stephania dielsiana Y. C. Wu. bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng sử dụng chất hiện màu hoạt tính sinh học

Phân lập và xác định cấu trúc hợp chất alcaloid ức chế acetyl cholinesterase của loài Stephania dielsiana Y. C. Wu. bằng phương pháp sắc ký lớp mỏng sử dụng chất hiện màu hoạt tính sinh học

PHÂN LẬP VÀ XÁC ĐỊNH CẤU TRÚC HỢP CHẤT ALCALOID ỨC CHẾ ACETYL CHOLINESTERASE CỦA LOÀI STEPHANIA DIELSIANA Y. C. WU.

BẰNG PHƯƠNG PHÁP SẮC KÝ LỚP MỎNG SỬ DỤNG CHẤT HIỆN MÀU HOẠT TÍNH SINH HỌC

Đỗ Quyên1,*, Đỗ Thị Hà2

1Đại học Dược Hà Nội; 2Viện Dược liệu

*Email: doquyenhup@gmail.com

(Nhận bài ngày 16 tháng 3 năm 2015)

Tóm tắt

Mục tiêu của nghiên cứu là phân lập và xác định các hợp chất alcaloid có hoạt tính ức chế AChE từ rễ củ loài Stephania dielsiana Y.C.Wu., dựa trên phát hiện các chất này bằng sắc ký lớp mỏng sử dụng chất hiện màu hoạt tính sinh học theo nguyên tắc của Ellman. Kết quả nghiên cứu cho thấy, khi khai triển trên bản mỏng với hệ dung môi cloroform : aceton : NH4OH [8:2:0,1], trên sắc ký đồ của dịch chiết alcaloid toàn phần có 7 vết alcaloid (phát hiện bằng phun thuốc thử Dragendorff) và tất cả các alcaloid này đều có hoạt tính ức chế AChE sau khi phun thuốc thử hiện màu hoạt tính sinh học. Trong số đó, đã phân lập được 2 alcaloid từ rễ củ loài Stephania dielsiana Y.C.Wu. bằng phương pháp sắc kí cột mở silica gel. Dựa trên tính chất hóa lý, phân tích phổ khối ESI-MS và phổ cộng hưởng từ hạt nhân 1H-NMR và 13C-NMR đã xác định được cấu trúc hóa học của 2 alcaloid là oxostephanin và palmatin. Sau đó, thử tác dụng ức chế AChE của 2 alcaloid này bằng phương pháp đo quang cho thấy ở nồng độ 100 và 50 µg/ml, hoạt độ ức chế enzym của palmatin là lần lượt 91,6% và 84,7%, của oxostephanin lần lượt là 33,6% và 17,3%.

Từ khóa: Hoạt tính ức chế acetyl cholinesterase, Stephania dielsiana Y.C.Wu, Thuốc hiện màu hoạt tính sinh học, Palmatin, oxostephanin.

Summary

Isolation and Elucidation of Acetyl cholinesterase Inhibitors from Stephania dielsiana Y.C.Wu by Thin Layer Chromatography with Bioactivity Staining

In this article, we report the study of chemical compositions from the root of Stephania dielsiana Y.C.Wu. which inhibit acetyl cholinesterase by using thin layer chromatography with bioactivity staining. Firstly, the total alkaloid from root of Stephania dielsiana Y.C.Wu. was extracted by moisturing the raw material with ammoniac 10%, reflux in cloroform. Then, by using thin layer chromatography with bioactivity staining, seven alkaloid spots with acetyl cholinesterase inhibition were detected. Finally, by using the flash column chromatography, two alkaloids in seven compounds were isolated. Both of them were identified as oxostephanine and palmatine by analyzing ESI-MS, 1H-NMR, 13C-NMR spectra and comparing to those of published data. We also tested the acetyl cholinesterase inhibitory activity of two alkaloids by spectrophotometric method. The result showed that at two concentrations of 100 and 50 µg/ml, acetyl cholinesterase inhibitory activity of palmatine as 91.6% and 84.7%, oxosterphanine as 33.6% and 17.3%, respectively.

Keywords: Acetyl cholinesterase, Stephania dielsiana Y.C.Wu., Oxostephanine, Palmatine.

 

 

(Nguồn tin: )