NGHIÊN CỨU NHÂN GIỐNG IN VITRO DÂY THÌA CANH

BẰNG NUÔI CẤY CHỒI ĐỈNH

Vũ Hoài Sâm¹, Nguyễn Quang Hải², Dương Thị Phúc Hậu¹, Nguyễn Văn Khiêm^1,*

¹Viện Dược liệu; ²Đại Học Nông nghiệp Hà Nội

*Email: ngvankhiem@yahoo.com

(Nhận bài ngày 14 tháng 11 năm 2014)

Tóm tắt

Dây thìa canh (Gymnema sylvestre (Retz.) R. Br. ex Shult.) là một trong những cây thuốc quý được sử dụng điều trị bệnh tiểu đường. Trong nghiên cứu này, cây dây thìa canh đã được tái sinh in vitro thành công bằng nuôi cấy chồi đỉnh. Chồi đỉnh của cây dây thìa canh 6-12 tháng tuổi trồng trong nhà kính được thu thập, khử trùng bằng cồn 70% trong 1 phút, sau đó bằng HgCl₂ (0,1%) trong 10 phút. Tỷ lệ mẫu cấy vô trùng phát sinh chồi đạt 40,3%. Môi trường thích hợp cho tái sinh chồi là MS + sucrose (30 g/l) + than hoạt tính (0,3 g/l). Chồi tái sinh được chuyển sang môi trường nhân nhanh chồi MS + BA (1,5 mg/l) + α-NAA (0,2 mg/l) + sucrose (30 g/l) + than hoạt tính (0,3 g/l). Hệ số nhân chồi đạt cao nhất 3,5 lần sau 4 tuần nuôi cấy. Để tạo rễ, chồi tái sinh được nuôi cấy trong môi trường tạo rễ MS/2 + α-NAA (1 mg/l) + sucrose (30 g/l) + than hoạt tính (0,3 g/l). Tỷ lệ chồi tái sinh tạo rễ đạt 46,7% sau 4 tuần nuôi cấy. Tất cả các mẫu nuôi cấy được duy trì trong phòng nuôi ở nhiệt độ 26^oC, 2000 lux, chu kỳ 16 h sáng : 8 h tối. Cây hoàn chỉnh được cấy chuyển trồng trong bầu đất chứa tỷ lệ cát và đất mùn (1:1) ở nhà kính. Tỷ lệ cây sống đạt 68,3% sau 4 tuần.

Từ khóa: Dây thìa canh, MS, Nhân giống vô tính, Nuôi cấy chồi đỉnh, Tái sinh cây.

Summary

In vitro Propagation of Gymnema sylvestre (Retz.) R. Br. ex Schult. via Apical Bud Culture

Gymnema sylvestre (Retz.) R. Br. ex Schult. is a valuable medicinal plant used in the treatment of diabetes. In the present study, G. sylvestre plantlets were successfully regenerated using apical bud culture technology. Apical buds of 6-12 months old plants growing in the greenhouse were collected, surface-sterilized with 70 % alcohol  for 1 minute, then 0.1 % HgCl₂ for 10 minutes. The sterile explants rate reached 40.3%. Suitable medium for shoot regeneration was MS + sucrose (30 g/l) + activated charcoal (0.3 g/l). Regenerated shoots were transferred to shoot multiplication medium MS + BA (1.5 mg/l) + α-NAA (0.2 mg/l) + sucrose (30 g/l) + activated charcoal (0.3 g/l). Highest shoot multiplication rate reached 3.5 (fold) after 4 weeks of culture. For rooting induction, regenerated shoots were cultured on MS/2 medium + α-NAA (1 mg/l) + sucrose (15 g/l) + activated charcoal (0.3 g/l). Root induced shoot reached highest frequency of 46.7% after 4 weeks of culture. All cultures were maintained in a culture room at 26^oC, 2000 lux, a photoperiod of 16/8 hr (light/dark). The plants bearing healthy leaves and a good root system were transferred into plastic bags containing presterilized sand:humus (1:1) in the greenhouse. Survival plant rate reached 68.3% after 4 weeks.

Keywords: Valuable medicinal plants, Gymnema sylvestre, MS, In vitro propagation, Apical bud culture, Plant regeneration.

(Nguồn tin: )